导读

溶菌酶是一种人造抑菌、杀菌卵白质，具备其余物理以及化学杀菌因子所不具备的牢靠性、无传染等特色。这就决定了它将在种种抗菌杀菌技术畛域中有宽泛的运用。在石家庄宠物医院行业中也有诸多溶菌酶的运用，而在石家庄宠物医院的业界畛域内，河北动物医院对于溶菌酶有着加倍独到的疗法与见识

溶菌酶（E.C，3.2.1.17）是由英国细菌学家弗莱明在1922年发现的[1]，它宽泛存在于人造界动物、动物以及微生物中，其全称为1,4-β-N-溶菌酶，又称胞壁质酶或者N-乙酰胞壁质聚糖水解酶。少许钻研证实，溶菌酶由单核-巨噬细胞渗透，是溶酶体酶的一种，浸染于细菌以及全副真菌的细胞壁肽聚糖，是一种高效的抗菌剂，它能切断肽聚糖中N-乙酰葡糖胺以及N-乙酰胞壁酸之间的β-1,4糖苷键，破损肽聚糖支架，在外部浸透压的浸染下细胞胀裂开，引起菌体裂解诞生[2]。人以及动物的细胞无细胞壁结构亦无肽聚糖，故溶菌酶对于其不毒性浸染。如下由河北动物医院整理医学钻研资料，本着开卷有利的精神与列位一起分享以及品评辩说。

1 溶菌酶的源头以及分类

1963年乔利斯以及坎菲尔德钻研了溶菌酶的一级结构，两年后英国的菲利宽泛其共事们用X射线衍射法剖析了溶菌酶，这是天下上**个残缺弄清了平面结构的酶，是近代酶化学钻研的*大成果之一。溶菌酶宽泛存在于家禽以及鸟类的蛋清中以及哺乳动物的泪液、唾液、血浆、尿液、乳汁、白细胞及其余体液以及机关（如肝、肾）细胞内，从大麦、芜菁、无花果、木瓜、卷心菜、萝卜等动物中也能别离出溶菌酶，其中以蛋清中含量*高（约0.3%），但人乳、眼泪、唾液中的溶菌酶活性却远高于蛋清中（约为3倍）或者其余源头的溶菌酶的活性[3]。除这些人造原资料外，如今还可能经由基因工程伎俩取患上溶菌酶。

比喻人溶菌酶（human lysozyme，hLY）是由130个氨基酸残基组成，相对于份子量14700kb。国内外有良多对于hLY基因克隆、表白的报道。Takaki报道用基因化学分解方式分解hLY的全基因（包罗hLY前体信号肽的18个氨基酸残基基因），并将它转至酵母菌细胞中表白，取患上高效表白的hLY。Maria报道从人体机关细胞系U-937提取总RNA，经逆转录为cDNA后克隆至真核表白载体中表白。钱世钧等报道用基因化学分解的方式分解hLY的全基因（基因序列是依据大肠杆菌偏心的明码子妄想，不包罗hLY的前体信号肽全副），克隆至原核表白载体中妨碍了高效表白。

蛋清溶菌酶可分解溶壁小球菌、芽孢杆菌等革兰氏阴性菌，但对于一些罕有的致病细菌如大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌等革兰氏阴性菌根基上不起浸染，由此可见，尽管蛋清溶菌酶含量*丰硕，但杀菌畛域小，浸染有限。人或者动物的溶菌酶则具备广谱的杀菌成果，并具备生物相容性好、对于机关无宽慰、无毒性的特色，*先是从人或者动物的乳汁、胎盘中提取，因为源头难题，提取方式重大，不能妨碍大规模工业化消耗。以是接管基因工程技术，从细菌或者酵母中消耗溶菌酶是解决其供需矛盾的主要蹊径。

依据溶菌酶的区别结构可将其分为C型、G型以及噬菌体型溶菌酶[4]。C型溶菌酶由129或者130个氨基酸残基组成，相对于份子量约为14700kb，其活性中间为Glu-3五、Asp-5二、Trp-62以及Trp-108，是仅有同时存在于脊椎动物、原索动物（文昌鱼）以及无脊椎动物中的规范，也是当初钻研患上*宽泛、*透辟的规范，大全副溶菌酶都属于C型，鸡蛋卵清溶菌酶、从人的乳汁、尿液、胎盘中提取的溶菌酶都属于C型。G型溶菌酶即鹅卵清溶菌酶，约含185个氨基酸残基，相对于份子量为21000kb。噬菌体溶菌酶存在于种种噬菌体内，对于消融宿主菌起紧张浸染，它含有164个氨基酸残基，相对于份子量为187000kb。

2 溶菌酶的理化特色

溶菌酶是一种碱性球卵白，份子中碱性氨基酸、酰胺残基及馥郁族氨基酸如色氨酸的比例很高。溶菌酶是**晃动的卵白质，pH在1.2～11.3畛域内猛烈变换时，其结构简直巩固，对于溶菌酶的活性来说，*事实的条件是pH6.0～7.0。溶菌酶遇热也很晃动，pH4.0～7.0，100℃解决1min仍能连结原酶活性；pH5.5，50℃加热4h后，酶变患上更沉闷。它的热变性是可逆的，变性的临界点是77℃，随溶剂的变换变性临界点也有变换，当变性剂pH在1如下时，变性临界点降到43℃。艰深说来，变性剂能增长酶的热变性，但变性剂过多时，溶菌酶的热变性不可逆。在碱性情景中，用高温解决时，酶活性着落。氧化剂也能对于酶的活性起阻止浸染，而食盐则相同能起活化浸染。粉状溶菌酶若接管高温去世板贮存，简直可临时不蜕变。纵然在pH为中性的水溶液中，该酶也可连结数天而不损失其活性。

3 溶菌酶在抗菌杀菌技术畛域中的运用

溶菌酶是一种人造抑菌、杀菌卵白质，具备其余物理以及化学杀菌因子所不具备的牢靠性、无传染等特色。这就决定了它将在种种抗菌杀菌技术畛域中有宽泛的运用。

3.1 食物保鲜防腐

溶菌酶是一种人造存在的卵白质，无毒有害，可间接用于食物的防腐保鲜。张凤凯等乐成钻研了一种溶菌酶冷却肉保鲜剂Hnsafety-008，该保鲜剂残缺接管牢靠、无毒、人造的物资迷信的配比而成，可能缩短冷却肉的保质期1-4倍。而且该保鲜剂可耐受95℃如下的温度，而连结性子晃动。溶菌酶也可用于乳废品的防腐，在奶酪加工历程中削减未必量的溶菌酶可能防御中前期奶酪的起泡、变味，还可能连结奶酪老化历程中奶酪基液的品质，更紧张的是其可能起到临时的杀菌浸染，实用操作酪酸的发酵。除此之外，溶菌酶也可用于食物软包装资料的抗菌保鲜、酒及饮料的防腐、水产物的杀菌消毒等方面。

3.2 空气传染杀菌

空气中的细菌是吸附在灰尘微粒上的，罕有的致病菌有结核分枝杆菌、白喉棒状杆菌、百日咳鲍特菌、金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、脑膜炎奈瑟菌、军团菌等，可引起呼吸道盛行症或者伤口熏染，思考到牢靠因素，个别接管玻璃纤维HEPA等过滤器对于空气妨碍过滤传染除菌。可是，微生物简略在HEPA上孳生、散漫，组成二次传染。国内有人钻研乐成了一种溶菌酶PPHEPA过滤器，它将溶菌酶固载在HEPA的全部滤纸纤维上，可能在纤维外部捉拿杀灭微生物，实用地防御二次传染。

3.3 口腔杀菌消炎

细菌是口腔疾发病作的主要原因，蛀牙、牙髓炎、根尖周炎以及全副口腔黏膜病都以及口腔细菌的熏染密不可份。溶菌酶当初曾经运用于口腔疾病的防御以及治疗。在口腔内运用溶菌酶可能修复机关，有利于口腔溃疡的愈合。溶菌酶与增效剂、晃动剂还可制成口腔清洁液，对于多少种引起口腔疾病的致病菌，如葡萄球菌、溶血性链球菌、红色念珠菌等有抑杀浸染，经由检测，5min内杀菌率达99.9%。急性毒性试验、积贮毒性试验、微核试验、黏膜宽慰试验等牢靠性评估，均适宜要求。体外杀菌试验也证实，溶菌酶复合制剂能实用抑制以及杀灭口咽部致病菌，可能实用治疗急慢性咽炎、扁桃体炎等口腔疾病。

3.4 医疗中皮肤的抗菌、杀菌照料护士

肽聚糖是细菌细胞壁的紧张组成成份，溶菌酶可水解肽聚糖中N-乙酰胞壁酸（NAM）以及N-乙酰葡糖胺（NAG）中的β-1,4糖苷键，在浸透压浸染下导致细菌细胞壁割裂，发生溶菌浸染。在体内情景下，因为有渗透型免疫球卵白A、补体退出，溶菌酶还能水解某些革兰氏阴性菌，如Ecoli等。因为真菌细胞壁中NAM以及NAG之间组成的β-1,4糖苷键（多少丁质）也是溶菌酶浸染的底物，以是溶菌酶可能抗含有多少丁质细胞壁的真菌熏染。溶菌酶还能与种种引起炎症的酸性物资散漫，使其失活，并增强抗生素以及其余药物的疗效，改善机关基质的粘多糖代谢，从而有利于修复被炎症伤害的机关。人溶菌酶能激活血小板，改善全副机关循环拦阻，分解脓液，增强全副防守，从而更好地抗菌、消炎、止痛。

3.5 溶菌酶在擦伤、烧伤创面熏染中的运用

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（Methicillin-resistantStaphylococcus aureus, MRSA）是烧伤创面熏染的主要菌株之一，近些年来熏染发生率不断回升，因为多种抗生素以及创面外用药物的运用及菌株的变异，泛起了MRSA及中间型抗万古霉素金黄色葡萄球菌等耐药菌株，其熏染水平难以操作，导致创面不愈合。李罗珠等用复合溶菌酶治疗190例烧伤患者，运用48.96h后，对于MRSA的有功能98%～****，对于中间型抗万古霉素金黄色葡萄球菌的有功能为10%～33%，从而证实复合溶菌酶对于MRSA及中间型抗万古霉素金黄色葡萄球菌有清晰的杀菌成果，是治疗烧伤创面熏染的用药抉择之一。

当初临床上运用的溶菌酶很概况是鸡蛋清溶菌酶，因为它是一种异源卵白，在动物体内会产生免疫原性以及副浸染。经由基因工程取患上的溶菌酶则否则，它原本便是动物体内的一种卵白质，以及动物体具备人造相容性，而且其抗菌、杀菌浸染更强，因此，接管基因工程技术,从细菌或者酵母中消耗人或者动物的溶菌酶，开辟新的溶菌酶资源，着落消耗老本，能耐增长溶菌酶在事实中的运用。随着医药技术的发展，对于溶菌酶的需要量也日益增大，溶菌酶势必在未来的医疗中发挥越来越大的浸染。

在雏鸡饲料中添加1-2%的羽毛粉，对防止啄羽等恶癖有效。肉鸡、蛋鸡饲料中使用羽毛粉可补充含硫氨基酸的不足，可部分取代大豆粕及鱼粉，用量以3%左右为宜。若用量超过5%可使肉鸡生长不佳，蛋鸡产蛋率下降，蛋重减轻。

参考文献

[1]Fleming A. On a remarkable bacteriolytic element found in tissues andsecretions[J]. Proc R Soc Lond B Biol Sci, 1922,93:306.

[2] 贾向志,李元. 溶菌酶的钻研妨碍[J]. 生物技术通信, 2002, 13(5):374～377.

[3] 林背阴. 溶菌酶及其运用钻研[J]. 中国食物削减剂, 2005,10(6):103～106.

[4]Imoto T. Enjoying Research on Lysozyme for 42 years[J]. Yakugaku Zasshy, 2003,123